氨氮的測定--納氏試劑分光光度法顯色影響
1.顯色劑的顯色時間
顯色時間的長短對顯色有一定的影響,準(zhǔn)確掌握顯色時間是做好校準(zhǔn)曲線的重要環(huán)節(jié)。多次實驗表明,顯色時間應(yīng)為10~30 min內(nèi),此時線性關(guān)系,10 min前顯色不完全,顯色45 min后,其顏色不穩(wěn)定,變化較快。應(yīng)注意的是全部樣品以測定上分光操作不超過5min為宜,這就要求每次比色管不能太多,而且動作要迅速,以達(dá)到準(zhǔn)確、高質(zhì)的測定效果。
2.顯色溫度對吸光度的影響
溫度影響納氏試劑與氨氮反應(yīng)的速度,并顯著影響溶液顏色。實驗表明,反應(yīng)溫度為25℃時,顯色完全;5~15℃吸光度無顯著改變,但其顯色不完全;當(dāng)溫度達(dá)30℃時,溶液褪色,吸光度出現(xiàn)明顯偏低現(xiàn)象,溶液易出現(xiàn)渾濁。因而實驗顯色溫度應(yīng)控制在20~25℃,以保證分析結(jié)果的可靠性。
3.顯色時溶液pH值的選擇
由氨氦反應(yīng)原理可知,OH濃度影響反應(yīng)平衡。納氏試劑是強(qiáng)堿性溶液,有一定的緩沖能力,當(dāng)加入納氏試劑后,顯色的pH適宜范圍應(yīng)控制在11.8~13.4,pH低于11.8,不產(chǎn)生顏色反應(yīng),pH高于13.4,溶液立即變渾,無法測量吸光度。