目前想要了解河流、湖泊、水庫等地表水是否富營養(yǎng)化可以通過檢測水中的磷、氮等營養(yǎng)物質(zhì)的含量進行判斷,也可以通過觀測水中藻類的繁殖情況判斷。但今天我們要講的是通過檢測水中葉綠素a來確定水體是否富營養(yǎng)化。大家都知道水體富營養(yǎng)化最主要的表現(xiàn)就是水中藻類大量的繁殖,而所有的藻類都含有葉綠素a,因此通過水體中葉綠素a的含量高低可以判斷該水中藻類的數(shù)量。
其方法原理是將一定量樣品用濾膜過濾截留藻類,研磨破碎藻類細胞,用丙酮溶液提取葉綠素,離心分離后分別于750nm、664nm、647nm和630nm波長處測定提取液吸光度,根據(jù)公式計算水中葉綠素a的濃度。
采集河流中葉綠素a水樣
檢測所需試劑和儀器
實驗試劑
1 丙酮。
2 碳酸鎂。
3 丙酮溶液:9+1。
在900ml丙酮中加入100ml實驗用水。
4 碳酸鎂懸濁液。
稱取1.0g碳酸鎂,加入100ml實驗用水,攪拌成懸濁液(使用前充分搖勻)。
5 玻璃纖維濾膜:直徑47mm,孔徑為0.45um-0.7um。
實驗儀器
1 采樣瓶:1L或500ml具磨口塞的棕色玻璃瓶。
2 過濾裝置:配真空泵和玻璃砂芯過濾裝置。
3 研磨裝置:玻璃研缽或其他組織研磨器。
4 離心機:相對離心力可達到1000×g(轉(zhuǎn)速3000r/min~4000r/min)。
5 玻璃刻度離心管:15ml,旋蓋材質(zhì)不與丙酮反應。
6 可見分光光度計:配10mm石英比色皿。
7 針式濾器:0.45um聚四氟乙烯有機相針式濾器。
8 一般實驗室常用儀器和設備。
水樣采集與保存
水樣的采集一般使用有機玻璃采水器或其他適當?shù)牟蓸悠鞑杉嫦?.5m水樣,湖泊、水庫根據(jù)需要可進行分層采樣或混合采樣,采樣體積為1L或500ml。如果水樣中含沉降性固體(如泥沙等),
應將水樣搖勻后倒入2L量筒,避光靜置30min,取水面下5cm水樣,轉(zhuǎn)移至采樣瓶。在每升水樣中加入1ml碳酸鎂懸濁液,以防止酸化引起色素溶解。
水樣采集后應在0℃-4℃避光保存、運輸,24h內(nèi)運送至檢測實驗室過濾(若水樣24h內(nèi)不能送達檢測實驗室,應現(xiàn)場過濾,濾膜避光冷凍運輸),水樣濾膜于-20℃避光保存,14d內(nèi)分析完畢。
制備水樣
在過濾裝置上裝好玻璃纖維濾膜。根據(jù)水體的營養(yǎng)狀態(tài)確定取樣體積,具體可以參考過濾水樣體積,用量筒量取一定體積的混勻水樣,進行過濾,最后用少量蒸餾水沖洗濾器壁。過濾時負壓不超過50kPa,在水樣剛剛完全通過濾膜時結束抽濾,用鑷子將濾膜取出,將有水樣的一面對折,用濾紙吸干濾膜水分。